تخریب آنزیمی کلسترول زرده تخم مرغ
تخریب آنزیمی کلسترول زرده تخم مرغ
چکیده، یک روش کروماتوگرافی گاز سریع، قابل اعتماد و صحیح برای تعیین کلسترول در تخم مرغ و غذاهای فراوری شده ، از روش ارائه شده تویط کواسک1990 اتخاذ شده است. یک نمونه در یک لوله مهر و موم شده با محلول پتاسیم هیدروکسید در اتانول حاوی استاندارد داخلی، هیدروکلسترول گرم شد. سپس از طریق استخراج حلال ، استرول ها جدا شدند و به مشتقات trimethylsiyl تبدیل شده و در معرض گاز کروماتوگرافی قرار گرفتند.
این روش برای تعیین محتوای کلسترول تعدادی از غذاها به منظور اثبات کاربرد آن در ماتریس پیچیده تر به کار رفت. در بین تولیداتی که از تخم مرغ به دست می ایند، ماکارونی تخم مرغ ایتالیایی (0.14-0.74 mg/g) کمتر از رشته فرنگی تخم مرغ (0.87-1.33 mg/g) حاوی کلسیم بود. برخی از رول های تخم مرغ به میزان 1.72-3.6 lm/g دارای مقادیر کلسیم هستند. در بین غذاهایی که از گوشت تهیه می شوند، میزان کلسترول محصولات ژامبون شبیه به کیک گوشت خوک و یا استیک گوشت خوک به ترتیب (0.59-0.67 mg/g و 0.66-0.8 mg/g ) بود. توپ های ماهی و پنیر چدار تقریبا حاوی همان مقدار کلسترول ( به ترتیب 0.93 mg/g و 0.95 mg/g ) است. در بین تمام غذاهایی که بررسی کردیم، جگر مرغ،خمیر مرغ و میگو دارای بالاترین سطوح کلسترول بودند. ظرفیت چهار اکسید کلسترول، از سودوموناس فلورسنسpf ، نوکاردیا اریتروپلیس Ne ، گونه های بریویباکتریوم BS ، گونه های استریپ تومیسس Ss و ردوکتاز کلسترول که از برگهای خیاربای کاهش کلسترول زرده تخم مرغ به دست آمده است ، بررسی شد.
جوجه کشی از زرده تخم مرغ با ردوکتاز کلسترول به مدت 72 ساعت، در دمای 37 درجه سانتیگراد منجر به کاهش حداقل 3.6% کلسترول گردید. در مقابل، تا 93.4٪ از کل کلسترول موجود توسط اکسیداس کلسترول با استفاده از از سودوموناس فلورسنس و گونه های استرپتومایسس در شرایط مشابه تخریب شد. اکسیداس کلسترول در 4 دمای درجه سانتیگراد، از سودوموناس فلورسنس می تواند تا 64/9% کلسترول بعد از 48 ساعت کاهش یاید، کلسترولی که کاهش می یابد، به ندرت در دمای 4 درجه سانتیگراد با اکسیداس کلسترول های دیگر مشاهده می شود. موثرترین درجه حرارت برای اکسیداس کلسترول Bs ، 37 درجه سانتیگراد و برای اکسیداس هاس کلسترول دیگر 45 درجه سانتیگراد بود.میزان درجه حرارت موثر این آنزیم که از سودوموناس فلورسنس به دست آمده است، بین 15 تا 60 درجه سانتیگراد بود و در 5 تا 37 درجه سانتیگراد به وضوح بالاتر از سه اکسیداس دیگر بود. ظرفیت اکسیداس کلسترول برای کاهش کلسترول در زرده تخم مرغ از این فرمول پیروی می کرد:
Pf > N e > Ss > Bs
غلظت بهینه آنزیم برای تخریب کلسترول برای اکسیداس کلسترول pf در کلسترولmoleµ/0.5u بود. حتی در غلظت 0.125 moleµ، تخریب اکسیداس کلسترول تا یک سوم کلسترول تخم مرغ در 2 ساعت انجام می شود. فعالیت های تخریب کلسترول برای ابزار بر رودوکوکوس،ایریتوروپولیس رودوکوکوس و دو نوع غیرگونه ای انها که از رودوکوکوس به دست آمده اند، در زرده تخم مرغ و شیر بررسی شدند. هنگامی که این میکروارگانیسم ها در کلسترول متوسط رشد میکنند ،منجر به شکل گیری هاله ای در اطراف کلنی باکتری رودوکوکوس می شوند که سازگار با تولید آنزیم کلسترول است. توانایی ابزار رودوکوکوس شماره 23 در کاهش کل شیر UHT هموژنیزه یا آماده سازی رقیق شده تا نصف نیروی آن ، بسیار اندک بود. با این حال ابزار R شماره 23 تا میزان 52/7 درصد تخریب کلسترول در ایجاد نیروی 1/8درصدی شیر UHT موثر است. در این آماده سازی ، تخریب کلسترول ، با رشد ابزار Rسلول شماره 23 که در باکتری شیر UHT و نه درمحصول مصنوعی قبل از تعیین تخریب کلسترول به کار رفت ، افزایش یافته است.
این سیستم تخریب کلسترول ابزار R شماره 23 به همان اندازه در کاهش غلظت کلسترول در زرده تخم مرغ موثر بود. میزان تخریب کلسترول نیز از طریق روش پیش –جوجه کشی سلولهای ابزار R شماره 23 در زرده در مقایسه با متوسط مصنوعی به دست آمد. تخریب کلسترول زرده تخم مرغ تقریبا بعد از رشد ابزار rrr شماره 23 برای 7d در 37 درجه سانتیگراد کامل شد.
